| Revista: | Universitas médica |
| Base de datos: | PERIÓDICA |
| Número de sistema: | 000365056 |
| ISSN: | 0041-9095 |
| Autors: | García, Claudia María1 Lozano, Patricia1 Rivera, José Antonio1 Giono, Silvia2 Martínez, Ygnacio1 Rocha García, Rosa del Carmen1 |
| Institucions: | 1Benemérita Universidad Autónoma de Puebla, Instituto de Ciencias de la Benemérita, Puebla. México 2Instituto Politécnico Nacional, Escuela Nacional de Ciencias Biológicas, México, Distrito Federal. México |
| Any: | 2008 |
| Període: | Oct-Dic |
| Volum: | 49 |
| Número: | 4 |
| Paginació: | 436-452 |
| País: | Colombia |
| Idioma: | Español |
| Tipo de documento: | Artículo |
| Enfoque: | Analítico, descriptivo |
| Resumen en español | Se diseñó una estrategia metodológica para la detección simultánea entre Haemophilus influenzae serotipo b (Hib) y no tipificable (HiNT), así como para discriminar entre H. influenzae, Moraxella catarrhalis y Streptococcus pneumoniae. El estudio se realizó en una recolección de 64 cepas, las cuales se sometieron a amplificación por PCR utilizando ADN genómico o directamente el cultivo bacteriano como plantilla. La PCR se realizó en dos fases: 1) PCR triple para discriminar entre H. influenzae y M. catarrhalis empleando oligonucleótidos específicos para los genes del ARNr 16S y de la neumolisina (Ply) para identificar S. pneumoniae; 2) PCR doble para la identificación simultánea de Hib y HiNT, utilizando oligonucleótidos específicos de los genes cap y hmw. Se logró la amplificación del gen ARNr 16S en las 64 cepas de H. influenzae, sin obtenerse amplificación en las cepas control. La secuencia Bex A se amplificó en 29 de 32 cepas de Hib, y la secuencia HMWA se amplificó en 29 de 30 cepas de HiNT. La amplificación con los oligonucleótidos específicos para M. catarrhalis y S. pneumoniae no mostró productos con ninguna cepa de H. influenzae. Estos resultados permiten proponer la aplicación de esta herramienta metodológica para discriminar entre M. catarrhalis y S. pneumoniae, e identificar H. influenzae directamente a partir de muestras clínicas |
| Resumen en inglés | A multiplex PCR assay was developed for the simultaneous detection of type b (Hib) and nontypeable Haemophilus influenzae (NTHi), and to discriminate among H. influenzae, Moraxella catarrhalis, and Streptococcus pneumoniae strains. Sixty four strains were subjected to PCR amplification using either genomic DNA or directly the bacterial culture as template. PCR was performed in two phases: 1) Triple PCR to discriminate among H. influenzae, M. catarrhalis, employing the specific primers 16S rRNA for each bacterial and S. pneumoniae using specific primer Ply (pneumolysin); 2) Duplex PCR for the simultaneous identification of Hib and NTHi strains, using specific primers BexA and HMWA. The 16S rRNA gene was amplified in 64 H. influenzae strains but not in control strains. The BexA sequence was amplified in 29 of 32 Hib strains; and HMWA sequence was amplified in 29 of 30 NTHi strains. The amplification with M. catarrhalis, and S. pneumoniae specific primers did not produce products with any H. influenzae strain. These data allow us to propose this methodology as a diagnostic tool to discriminate among M. catarrhalis and S. pneumoniae and to identify H. influenzae directly from clinical samples |
| Disciplines | Medicina |
| Paraules clau: | Diagnóstico, Microbiología, Neumología, Diagnóstico diferencial, Pruebas diagnósticas, Haemophilus influenzae, Moraxella catarrhalis, Streptococcus pneumoniae, Reacción en cadena de la polimerasa (PCR) |
| Keyword: | Medicine, Diagnosis, Microbiology, Pneumology, Differential diagnosis, Diagnostic tests, Haemophilus influenzae, Moraxella catarrhalis, Streptococcus pneumoniae, Polymerase chain reaction (PCR) |
| Text complet: | Texto completo (Ver PDF) |
