Validación de protocolos de PCR para el diagnóstico molecular de la Enfermedad de Chagas
Título del documento: Validación de protocolos de PCR para el diagnóstico molecular de la Enfermedad de Chagas
Revista: Salus
Base de datos: PERIÓDICA
Número de sistema: 000342942
ISSN: 1316-7138
Autors: 1
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Institucions: 1Universidad de Carabobo, Facultad de Ciencias de la Salud, Maracay, Aragua. Venezuela
2Ministerio de Salud, Dirección General de Salud Ambiental y Contraloría Sanitaria, Maracay, Aragua. Venezuela
3Universidad de Oriente, Centro de Medicina Tropical, Barcelona, Anzoátegui. Venezuela
4Universidad Central de Venezuela, Instituto de Zoología Tropical, Caracas, Distrito Federal. Venezuela
Any:
Volum: 12
Paginació: 88-93
País: Venezuela
Idioma: Español
Tipo de documento: Artículo
Enfoque: Experimental
Resumen en español La enfermedad de Chagas es causada por el parásito Trypanosoma cruzi. Esta enfermedad comprende una fase aguda, seguida de una fase crónica, con una parasitemia escasa y una clínica que va desde la ausencia de síntomas hasta una cardiopatía severa. El diagnóstico presenta limitaciones, debido a la baja sensibilidad de las técnicas parasitológicas y la baja especificidad de las inmunológicas. Las técnicas de PCR son una alternativa, pero estas deben ser estandarizadas y validadas antes de su uso. El objetivo de este trabajo fue validar las técnicas de PCR para la amplificación de ADN de minicírculo de kinetoplasto (PCR-ADNk) y ADN satélite (PCR-ADNsat) de T. cruzi. Se utilizaron 29 muestras de sangre y 19 de suero de pacientes diagnosticados previamente y 3 muestras de xenodiagnóstico de un paciente en fase aguda, resultando positivas por PCR-ADNk 26/29 (89,7%) y por PCR-ADNsat 23/29 (79,3%), mientras que utilizando suero resultaron positivas por PCR-ADNk 5/19 (26,3%) y por PCR-ADNsat 7/19 (36,8%). Las 3 muestras de xenodiagnóstico resultaron positivas (100%). Además, se analizaron 24 muestras de sangre y suero de individuos, negativos para las técnicas de diagnóstico parasitológico e inmunológico y sin factores de riesgo de la enfermedad, los cuales dieron negativo por ambas PCRs. La muestra de elección resultó ser sangre y se recomienda el uso de las dos técnicas de PCR en conjunto, ya que todos los pacientes con enfermedad de Chagas confirmada resultaron positivos (100%) por lo menos en una de las PCR evaluadas en muestras de sangre
Resumen en inglés Chagas disease is caused by the parasite Trypanosoma cruzi. The disease involves an acute phase, followed by a chronic phase, with a low parasitemia and a clinic that goes from no symptoms to severe heart disease. The diagnosis presents limitations due to low sensitivity of parasitological techniques and low specificity of the immunological ones. PCR techniques are an alternative, but these should be standardized and validated before use. The aim of this study was to validate the techniques of PCR to amplify DNA from kinetoplast minicircle (PCR-kDNA) and satellite DNA (PCR-satDNA) of T. cruzi. Were used 29 samples of blood and serum from 19 patients with confirmed Chagas disease and 3 samples of xenodiagnosis from a patient in acute phase. The results indicated that 26/29 (89.7%) were positive by PCR-kDNA and 23/29 (79.3%) by PCR-satDNA while using sera were positive by PCR-kDNA 5/19 (26.3%) and by PCR-satDNA 7/19 (36.8%). The 3 samples of xenodiagnosis were positive (100%). In addition, 24 samples of blood and serum of individuals with negative results of parasitological and immunological diagnostic techniques and without risk factors for the disease, were analyzed, which were negative by both PCRs. The sample of choice was blood and recommends the use of two PCR techniques together, since all patients with confirmed Chagas' disease were positive (100%) at least in one of the PCR evaluated in blood samples
Disciplines Medicina
Paraules clau: Diagnóstico,
Microbiología,
Parasitología,
Trypanosoma cruzi,
Diagnóstico molecular,
PCR,
ADN satelital,
Enfermedad de Chagas
Keyword: Medicine,
Diagnosis,
Microbiology,
Parasitology,
Trypanosoma cruzi,
Molecular diagnosis,
PCR,
Satellite DNA,
Chagas disease
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