Generación de raíces transformadas de Agave salmiana Otto y su colonización por Glomus intraradices



Título del documento: Generación de raíces transformadas de Agave salmiana Otto y su colonización por Glomus intraradices
Revista: Revista fitotecnia mexicana
Base de datos: PERIÓDICA
Número de sistema: 000430828
ISSN: 0187-7380
Autors: 1
2
2
3
2
Institucions: 1Universidad Autónoma de Zacatecas, Unidad Académica de Agronomía, Zacatecas. México
2Universidad Autónoma de Aguascalientes, Centro de Ciencias Básicas, Aguascalientes. México
3Universidad de Colima, Facultad de Ciencias Biológicas y Agropecuarias, Manzanillo, Colima. México
Any:
Període: Jul-Sep
Volum: 30
Número: 3
Paginació: 215-222
País: México
Idioma: Español
Tipo de documento: Artículo
Enfoque: Experimental, aplicado
Resumen en español El presente estudio es el primer reporte sobre la inducción de raíces transformadas por Agrobacterium rhizogenes en Agave salmiana Otto, así como del establecimiento de un hongo micorrízico en las mismas. Para lograr lo anterior se inocularon plantas germinadas in vitro con diferentes concentraciones de bacteria y de acetosiringona en varios sitios (hoja, tallo y raíz). El tiempo de cocultivo en oscuridad fue de 6 d. Las raíces transformadas se presentaron a los 25 d después de la inoculación. La mayor eficiencia de transformación resultó de la inoculación al tallo con 1x109 bacterias mL-1 y 200 µM de acetosiringona, condiciones en las que se obtuvo 63 % de raíces transformadas. La naturaleza transgénica de las raíces generadas se verificó mediante un ensayo histoquímico para detectar actividad de GUS y los transgenes se amplificaron en muestras de ADN de raíz a través de PCR. Se detectó actividad de GUS en 80 % de los tejidos probados, mientras que los genes rolB y nptII se amplificaron en 60 % de las muestras de ADN analizadas por PCR. Se demostró la capacidad de Glomus intraradices para colonizar in vitro las raíces transformadas de A. salmiana, con una eficiencia de colonización de 70 %. Se logró la recuperación de esporas hijas, con un promedio de 300 esporas hijas por cultivo, a los 6 meses de iniciada la inoculación
Resumen en inglés The present study is the first report on the induction of transformed roots in Agave salmiana Otto using Agrobacterium rhizogenes, as well as of the establishment of a micorrhizic fungus in the same roots. To achieve this, in vitro germinated plants were inoculated with several bacteria and acetosyringone concentrations, in several places (lea, stem and root). The time of cocultivation in darkness was of 6 d. Transformed roots were presented to the 25 d after inoculation. The higher transformation efficiency resulted from stem inoculation with 1x109 bacteria mL-1 and 200 µM acetosyringone, condition in which 63 % of transformed roots was obtained. The transgenic nature of the generated roots was verified by means of the GUS ssay and the transgenes were amplified through PCR in samples of root DNA. GUS activity was detected in 80 % of the proven roots, while rolB and nptII genes were amplified in 60 % of the DNA root samples analyzed by PCR. The ability of Glomus intraradices to colonize in vitro the transformed roots of A. salmiana was demonstrated with an efficiency of 70 %. The recovery of daughter spores was achieved with an average of 300 daughter spores per culture dish, after 6 months of inoculation
Disciplines Biología,
Agrociencias
Paraules clau: Plantas para uso industrial,
Fitotecnia,
Hongos,
Agave salmiana,
Glomus intraradices,
Agrobacterium rhizogenes,
Acetosiringona,
Micorrizas,
Mezcal,
Raíces,
Biotecnología
Keyword: Plants for industrial use,
Crop husbandry,
Fungi,
Agave salmiana,
Glomus intraradices,
Agrobacterium rhizogenes,
Acetosyringone,
Micorrhizae,
Mezcal,
Roots,
Biotechnology
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