| Revista: | Revista de investigaciones veterinarias del Perú |
| Base de datos: | PERIÓDICA |
| Número de sistema: | 000384640 |
| ISSN: | 1609-9117 |
| Autors: | Montenegro, Vanya1 Maturrano, Lenin1 Wheeler, Jane C1 Rosadio, Raúl1 |
| Institucions: | 1Universidad Nacional Mayor de San Marcos, Facultad de Medicina Veterinaria, Lima. Perú 2Instituto de Investigación y Desarrollo de Camélidos Sudamericanos, Lima. Perú |
| Any: | 2012 |
| Volum: | 23 |
| Número: | 3 |
| Paginació: | 377-387 |
| País: | Perú |
| Idioma: | Español |
| Tipo de documento: | Artículo |
| Enfoque: | Experimental |
| Resumen en español | Se reporta el desarrollo y optimizaciones de técnicas moleculares (PCR simple, múl- tiple y semi-anidada) para determinar el sexo de camélidos sudamericanos (CSA) amplifi- cando la secuencia del gen Zinc Finger Protein (ZF). La técnica utilizó ADN obtenido de 28 muestras de sangre de alpacas, llamas y vicuñas, 20 muestras de heces de vicuñas y guanacos conservadas en etanol al 96%, y 22 embriones de alpaca colectados entre 72 y 96 horas postmonta y preservados en etanol. Las muestras de ADN de sangre y heces fueron extraídas usando kits comerciales, y las de embriones aplicando tres métodos (ebullición, proteinasa K y fenol-cloroformo). Una vez optimizada la PCR simple para la detección de los genes ZFY y ZFX, se implementó la PCR múltiple para ADN de sangre y heces y la PCR semi-anidada para ADN de embriones. La técnica de PCR múltiple deter- minó el sexo correctamente en el 100% de las muestras de ADN sanguíneo, en el 87.5% de muestras de ADN de heces colectadas en 2008 y en el 50% de las muestras de ADN de heces colectadas en 2004 y preservadas durante cuatro años antes del análisis. La prue- ba de PCR semi-anidada, sin embargo, no pudo ser optimizada |
| Resumen en inglés | The objective of this study was to develop a PCR technique to determine the sex of South American camelids (CSA) using Zinc Finger Protein (ZF) sequences from blood and fecal samples, as well as cells from alpaca embryos. A total of 28 alpaca, llama and vicuña blood samples, 20 vicuña and guanaco fecal samples, and 22 alpaca embryos collected between 72 and 96 hours postcopula were used. The fecal and embryo samples were preserved in 96% and 70% ethanol respectively. DNA was extracted from blood and feces using commercial kits. Three methods (boiling, proteinase K and phenol-cloroform) were used to extract DNA from alpaca embryos. Two PCR techniques were developed to analyze DNA: multiplex (for fecal and blood sample DNA) and heminested PCR (for embryo cell DNA). The multiplex PCR accurately determined the sex in 100% of the DNA samples extracted from blood, in 87.5% of the samples extracted from fresh feces and in 50% of the 4-year old fecal samples. The heminested PCR, however, could not be optimized |
| Disciplines | Medicina veterinaria y zootecnia |
| Paraules clau: | Medicina veterinaria, Otras especies de interés zootécnico, Reproducción y genética animal, ADN, PCR, Camélidos, América del Sur, Sexado |
| Keyword: | Veterinary medicine and animal husbandry, Animal reproduction and genetics, Species of commercial interest, Veterinary medicine, DNA, PCR, Camelids, South America, Sexing |
| Text complet: | Texto completo (Ver PDF) |
