| Revista: | Revista brasileira de otorrinolaringologia |
| Base de datos: | PERIÓDICA |
| Número de sistema: | 000306722 |
| ISSN: | 0034-7299 |
| Autors: | Mendonca, Jeferson Cedaro de1 Dolci, Jose Eduardo Lutaif1 |
| Institucions: | 1Santa Casa de Sao Paulo, Faculdade de Ciencias Medicas, Sao Paulo. Brasil |
| Any: | 2005 |
| Període: | Mar-Abr |
| Volum: | 71 |
| Número: | 2 |
| Paginació: | 123-131 |
| País: | Brasil |
| Idioma: | Portugués, inglés |
| Tipo de documento: | Artículo |
| Enfoque: | Analítico |
| Resumen en inglés | Neuropeptides are important neurotransmitters in nasal physiology and the increasing knowledge of their role in nasal diseases brings new therapeutic perspectives. The investigation of human nasal mucosa neuropeptides is based mostly on immunocytochemistry, a complex approach whose resulting factors may be variable. Aiming to make this kind of research available, an immunofluorescence approach for vasoactive intestinal peptide (VIP) in human nasal mucosa is proposed and evaluated. STUDY DESIGN: Transversal cohort. MATERIAL AND METHOD: Human inferior turbinate samples were obtained at time of nasal surgery from eight patients. The samples were fixed in Zamboni solution (4% phosphate-buffered paraformaldehyde and 0.4% picric acid), snap-frozen and stored at -70ºC. 14 µm sections were then obtained. Immunofluorescence staining for VIP (Peninsula Laboratories) was performed and its images documented by conventional photography. The method's specificity, sensitivity and reproducibility of execution were evaluated. Additionally, the reproducibility of interpretation of results was evaluated through the comparison of staining scores (0 to 4) attributed to the images by six observers. RESULTS: The results showed the approach to be very specific and sensible, besides being reproducible in its execution. The interpretation of results may depend on the observer's accuracy in judging immunofluorescence images, but it showed uniformity. CONCLUSION: The proposed method was highly useful for research purposes in neuropeptides in human nasal mucosa |
| Resumen en portugués | Os neuropeptídeos são neurotransmissores relevantes na fisiologia nasal e o conhecimento crescente acerca de seu papel na fisiopatologia de doenças nasais abre novas perspectivas. A sua investigação na mucosa nasal humana baseia-se em grande parte em marcação imunológica, método complexo e sujeito a inúmeros fatores de erro. Com o intuito de viabilizar este tipo de pesquisa em nosso meio, um método de imunofluorescência para peptídeo intestinal vasoativo (VIP) na mucosa nasal humana é proposto e avaliado. FORMA DE ESTUDO: Coorte transversal. MATERIAL E MÉTODO: Oito pacientes submetidos a cirurgia funcional do nariz têm um fragmento de mucosa coletado da concha inferior. O tecido foi fixado em solução de Zamboni (paraformaldeído 4% tamponado e ácido pícrico 0,4%), congelado em nitrogênio líquido e armazenado. Cortes de 14 µm foram realizados e submetidos à reação de imunofluorescência para VIP (Península Laboratories). As imagens microscópicas foram documentadas em fotografia convencional. A especificidade, sensibilidade e reprodutibilidade de execução foram avaliadas. A reprodutibilidade de interpretação de resultados foi avaliada através da comparação de graus de marcação (0 a 4) atribuídos às fotos por seis observadores. RESULTADOS: Os resultados mostraram ser o método suficientemente específico, sensível, além de reprodutível em sua execução. A interpretação de resultados mostrou depender do perfeito esclarecimento do observador no julgamento das imagens de imunofluorescência, mas mostrou uniformidade. CONCLUSÃO: O método proposto foi considerado útil na pesquisa de neuropeptídeos na mucosa nasal humana |
| Disciplines | Medicina |
| Paraules clau: | Fisiología humana, Otorrinolaringología, Péptido intestinal vasoactivo, Neuropéptidos, Mucosa nasal, Inmunofluorescencia, Métodos de investigación |
| Keyword: | Medicine, Human physiology, Otolaryngology, Vasoactive intestinal peptide, Neuropeptides, Nasal mucosa, Immunofluorescence, Research methods |
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