| Revista: | Jornal brasileiro de reproducao assistida |
| Base de datos: | PERIÓDICA |
| Número de sistema: | 000270188 |
| ISSN: | 1517-5693 |
| Autores: | Mauri, A.L1 Baruffi, R.L.R Petersen, C.G Oliveira, J.B.A Vagnini, L Massaro, F.C Pontes, A2 Franco-Junior, J.G |
| Instituciones: | 1Centro de Reproducao Humana Prof. Franco Junior, Ribeirao Preto, Sao Paulo. Brasil 2Universidade Estadual Paulista "Julio de Mesquita Filho", Faculdade de Medicina de Botucatu, Botucatu, Sao Paulo. Brasil |
| Año: | 2007 |
| Periodo: | Jul-Sep |
| Volumen: | 11 |
| Número: | 3 |
| Paginación: | 16-19 |
| País: | Brasil |
| Idioma: | Inglés |
| Tipo de documento: | Artículo |
| Enfoque: | Experimental, aplicado |
| Resumen en inglés | The aim of this prospective study was to determine the DNA fragmentation levels before and after sperm preparation by layering method. A total of 78 patients submitted to assisted reproduction technology (ART) for infertility treatment were evaluated. Ejaculated spermatozoa were obtained by masturbation on the day of ART procedure. The evaluation of DNA fragmentation was performed in the fresh semen and after preparation by a layering method, respectively. After washing with PBS, the sperm pellets were smears and then processed for the terminal deoxyribonucleotidyl transferase (TdT)- mediated dUTP nick-end labelling (TUNEL) assay that was performed using a Cell Death Detection Kit with tetramethylrhodamine-labelled dUTP. For quantitative evaluation, 200 spermatozoa in randomly selected areas on microscope slides were evaluated and the percentage of TUNEL positive spermatozoa was determined. If ≥20% of selected sperm were TUNEL positive, the exam was considered abnormal. The mean percentage of DNA sperm fragmentation before sperm preparation was 17±8.3% and after 7.8±6.5% (p<0.0001). The exam was considered normal in 49 patients before preparation and in 73 patients after (p<0.0001). The sperm preparation with a layering method for the ART procedure is effective to select sperm with a significant decrease of the DNA damage |
| Resumen en portugués | O objetivo deste estudo perspectivo foi determinar os níveis de fragmentação DNA antes e depois do preparo do sêmen pelo método de camada. Foram avaliadas amostras de sêmen de 78 pacientes submetidos à reprodução assistida. A analise da fragmentação do DNA foi realizada no esperma antes e após o preparo pelo método de camada, através do teste TUNEL (the terminal deoxyribonucleotidyl transferase (TdT)-mediated dUTP nick-end labelling) utilizando o Kit In Situ Cell Death Detect, com tetramethylrhodamine-labelled dUTP. Para avaliação quantitativa, foram analisados 200 espermatozóides em áreas dos esfregaços selecionadas aleatoriamente e a porcentagem de espermatozóides TUNEL-positivos foi determinada. Se ≥20% da esperma selecionada eram TUNEL-positivo, o exame era considerado anormal. As porcentagens médias de fragmentação do DNA antes e após o preparo do sêmen foram 17±8.3 % e 7.8±6.5 % (p<0.0001), respectivamente. O exame foi considerado normal em 49 pacientes antes do preparo e em 73 pacientes depois do preparo (p<0.0001). Em conclusão, o preparo de esperma pelo método de camada para procedimentos de RA é eficaz para selecionar a esperma com uma redução significativa do dano do DNA |
| Disciplinas: | Biología |
| Palabras clave: | Biología celular, Genética, Reproducción y desarrollo, Fertilización in vitro, Semen, Fragmentación de ADN, Capacitación espermática |
| Keyword: | Biology, Cell biology, Genetics, Reproduction and development, In vitro fertilization, Semen, DNA fragmentation, Sperm capacitation |
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