| Revista: | Ciencia y tecnología (Quevedo) |
| Base de datos: | PERIÓDICA |
| Número de sistema: | 000342227 |
| ISSN: | 1390-4043 |
| Autors: | Vasco Mora, Diana1 Hernández Meroño, Marta2 Vásquez, Juan María2 Martínez, Emilio2 Roca, Jordi2 |
| Institucions: | 1Universidad Técnica Estatal de Quevedo, Unidad de Investigación Científica y Tecnológica, Quevedo, Los Ríos. Ecuador 2Universidad de Murcia, Departamento de Medicina y Cirugía Animal, Murcia. España |
| Any: | 2008 |
| Volum: | 1 |
| Número: | 1 |
| Paginació: | 23-29 |
| País: | Ecuador |
| Idioma: | Español |
| Tipo de documento: | Artículo |
| Enfoque: | Analítico, descriptivo |
| Resumen en español | La generación de ROS fue medida por citometría de flujo en muestras espermáticas descongeladas incubadas sin (niveles basales) o con (niveles inducidos) un inductor de ROS (1 mM de tert-butyl hidroperóxido) por 30 min a 39 °C y 5% de CO2 . Además, fueron simultáneamente teñidas con 2’, 7’-diacetato de diclorodihidrofluoresceína, acetil ester (1 mM, CM-H2 DCFDA), para estimar la producción de ROS e, ioduro de propidio (1.5 mM) para excluir la población espermática muerta. Los eyaculados de nueve verracos fueron congelados con 3% de glicerol y descongelados a ≈1200 ó ≈1800 ºC min-1. La producción de ROS fue medida a los 0, 60, 120, 240 y 360 min en muestras mantenidas a 21-23 °C (no incubadas), o a 39 ºC y 5% de CO2 (incubadas). La velocidad de descongelación no registró influencia (P>0.05) sobre la producción de ROS. La generación de ROS fue constante (P>0.05) en el tiempo en las muestras no incubadas, pero mostró un incremento progresivo en las muestras incubadas, siendo significativa (P<0.05) desde los 120 min en niveles basales ó 60 min de incubación en niveles inducidos. Además, una significativa variabilidad eyaculado/verraco fue evidente, tanto en niveles basales como inducidos en las muestras incubadas. La producción de ROS basal e inducida estuvo significativamente (P<0.01) correlacionada con la calidad espermática. La técnica utilizada es de gran utilidad para evaluar capacidad funcional en espermatozoides congelados-descongelados; sin embargo, se requieren estudios adicionales para estandarizar la misma y establecer umbrales indicativos de pérdida de calidad espermática |
| Resumen en inglés | The ROS generation was measured by flow citometry in thawed sperm samples incubated without (basal levels) or with (induced levels) a ROS inductor (1 mM tert-butyl hydroperoxide) for 30 min at 39 ºC and 5% CO2 . Sperm cells were simultaneously stained with 2’, 7’-dichlorodihydrofluorescein diacetate, acetil ester (1 mM, CMH2 DCFDA), to estimate the production of ROS, and propidium iodide (1.5 mM) to exclude dead sperm from the analysis. The ejaculates from nine boars were frozen with 3% of glycerol and warmed at ~1200 or ~1800ºC min-1. The ROS production was measured at 0, 60, 120, 240 y 360 min in sperm samples hold at ~21-23 ºC (not incubated) or at 39 ºC and 5% CO2 (incubated) over time. Warming rate had not influence (P>0.05) on ROS production. ROS generation was constant (P>0.05) over time in not incubated samples, but it showed a progressive increase in incubated samples, being it significant (P<0.05) from the 120 min in basal levels or 60 min of incubation in induced levels. Significant (P>0.01) ejaculate/boar variability was evident in both basal and induced ROS production in the incubated sperm samples. Both basal and induced ROS production were significantly (P<0.01) correlated with the percentages of total and rapid progressive, motile and viable spermatozoa. The technique is of great utility to evaluate functional capacity in frozen-thawed sperms; however, additional studies are required to standardize the same one and to establish indicative thresholds of sperm quality loss |
| Disciplines | Medicina veterinaria y zootecnia |
| Paraules clau: | Porcinos, Reproducción y genética animal, Criopreservación, Especies reactivas de oxígeno, Espermatozoides |
| Keyword: | Veterinary medicine and animal husbandry, Animal reproduction and genetics, Swine, Spermatozoa, Cryopreservation, Reactive oxygen species (ROS), Sperm |
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