| Revista: | Brazilian journal of microbiology |
| Base de datos: | PERIÓDICA |
| Número de sistema: | 000291124 |
| ISSN: | 1517-8382 |
| Autors: | Marassi, Carla Dray1 Fonseca, Leila de Souza2 Ristow, Paula Ferreira, Rachel3 Lilenbaum, Walter Oelemann, Walter M.R |
| Institucions: | 1Universidade Federal do Rio de Janeiro, Instituto de Microbiologia, Rio de Janeiro. Brasil 2Universidade Federal do Rio de Janeiro, Departamento de Microbiologia Medica, Rio de Janeiro. Brasil 3Universidade Federal Fluminense, Departamento de Bacteriologia, Niteroi, Rio de Janeiro. Brasil |
| Any: | 2005 |
| Període: | Abr-Jun |
| Volum: | 36 |
| Número: | 2 |
| Paginació: | 118-122 |
| País: | Brasil |
| Idioma: | Inglés |
| Tipo de documento: | Artículo |
| Enfoque: | Experimental, analítico |
| Resumen en inglés | Paratuberculosis (Johne's disease) is a chronic enteritis in cattle caused by infection with Mycobacterium avium subsp. paratuberculosis (Map). In Brazil, few reports describe the isolation of the organism. The gold standard test for Map is its isolation from tissues or feces. Moreover, bacterial growth is slow and test results are available only after three to five months of incubation Furthermore, shedding of bacilli at levels detectable by fecal culture is irregular and does not occur during the early stages of infection, which compromises the sensitivity of this methodology. The most common immunological tests to identify Map infection are complement fixation test (CFT), agar gel immunodiffusion (AGID) and enzyme-linked immunoassay (ELISA). In Brazil, commercial ELISA kits are imported and too expensive to be used as part of diagnostic laboratorial routine. Apart from that, their use has not yet been approved in the country. The aim of the present study was to improve an original assay PPA-ELISA protocol established by our group, and to determine sensitivity and specificity of the modified test. In a first step, we introduced modifications that minimized plate-to-plate and between-well variations, thus making the test more stable and reliable. In the second part of this study, a panel of 106 sera samples was tested by this modified PPA-ELISA protocol in order to estimate its sensitivity and specificity. The new assay presented overall sensitivity of 76.9% and specificity of 70.0%. Our study demonstrated that this assay could be |
| Resumen en portugués | Paratuberculose (doença de Johne) se caracteriza por uma enterite crônica de ruminantes, causada por Mycobacterium avium subesp. paratuberculosis (Map). O padrão ouro diagnóstico da infecção é a cultura e isolamento do microrganismo a partir de tecidos ou fezes. No entanto, seu crescimento demora de três a cinco meses e a excreção de Map em níveis detectáveis em cultura é irregular e não ocorre durante os primeiros estágios da infecção, o que diminui seus níveis de sensibilidade. No Brasil, existem poucos relatos de seu isolamento. Os testes imunológicos mais comuns para a identificação da infecção são: Fixação de complemento, imunodifusão em gel de agarose e ensaio imunoenzimático do tipo ELISA. No Brasil, kits comerciais ELISA de diagnóstico são importados e seu uso não está ainda aprovado. O objetivo deste estudo é melhorar um ensaio ELISA-PPA in-house previamente desenvolvido (10) e determinar sua sensibilidade e especificidade. Na primeira etapa deste estudo, as alterações do protocolo original contribuíram para diminuir as variações encontradas entre poços na mesma placa e entre placas em experimentos diferentes, o que demonstrou uma maior estabilidade e reprodutibilidade do teste. Na segunda etapa, um painel de 106 amostras de soros foi testado pelo protocolo modificado do ELISA-PPA para estimar seus índices de sensibilidade e especificidade. O ensaio apresentou sensibilidade de 76,9% e especificidade de 70,0%. Nosso estudo demonstrou que este ensaio pode ser recomendado como uma valiosa ferramenta para diagnóstico e controle da paratuberculose no Brasil e em outros países em desenvolvimento |
| Disciplines | Medicina veterinaria y zootecnia |
| Paraules clau: | Bovinos, Parasitología, Inmunología, Diagnóstico, Paratuberculosis, Serología, ELISA, Protocolos, Brasil |
| Keyword: | Veterinary medicine and animal husbandry, Bovines, Parasitology, Immunology, Diagnosis, ELISA, Serology, Trials, Brazil, Paratuberculosis |
| Text complet: | Texto completo (Ver HTML) |
