Transformación eficiente de segmentos de tallos de papa de la variedad Désirée, utilizando fosfinotricina como marcador de selección
Título del documento: Transformación eficiente de segmentos de tallos de papa de la variedad Désirée, utilizando fosfinotricina como marcador de selección
Revista: Biotecnología aplicada
Base de datos: PERIÓDICA
Número de sistema: 000349128
ISSN: 0864-4551
Autores: 1
1
1
1
1
1
1
Instituciones: 1Centro de Ingeniería Genética y Biotecnología, División de Plantas, La Habana. Cuba
Año:
Volumen: 24
Número: 2
Paginación: 132-138
País: Cuba
Idioma: Español
Tipo de documento: Artículo
Enfoque: Experimental
Resumen en español Se desarrolló una metodología rápida y eficiente para la transformación genética de segmentos internodales de tallos de papa (Solanum tuberosum L.), de la variedad Désirée, mediante Agrobacterium tumefaciens, utilizando fosfinotricina (PPT, glufosinato de amonio) como agente de selección. Esta metodología provocó una eficiencia de transformación del 68% y la inducción de brotes después de 4 a 5 semanas en presencia de 2 mg/L de fosfinotricina. Se empleó exitosamente el ensayo del clorofenol rojo en segmentos de hojas de plantas transformadas, lo cual demostró la expresión del gen bar. La presencia de este gen en el genoma de los clones resistentes se confirmó mediante reacción en cadena de la polimerasa. Además, se observó la elevada resistencia de clones transgénicos hasta la concentración de 500 mg/L de fosfinotricina, con un desarrollo fenotípico normal. Estas plantas transgénicas se transplantaron a casas verdes, y después de ser asperjadas con el herbicida Finale® (Bayer CropScience), a una concentración de 2.5 L/ha, se mantuvieron vigorosas y de color verde, a diferencia del control no transgénico, que murió después de 7 días
Resumen en inglés A fast and efficient methodology for transforming internodal segments in stems of potato (Solanum tuberosum L.) Désirée cultivar, with Agrobacterium tumefaciens and by using phosphinothricin (PPT, gluphosinate ammonium) as selection agent, was developed. Shoots obtained with 68% transformation efficiency were induced 4 to 5 weeks later in the presence of phosphinothricin at 2 mg/L. The chlorophenol red assay was successfully employed in segments of leaves from transformed plants, demonstrating the expression of the bar gene, and its presence was confirmed in the genome of explants by polymerase chain reaction. Moreover, increased resistance of transgenic clones at phosphinothricin concentrations up to 500 mg/L was observed, also showing a normal phenotypic development. These transgenic plants were transplanted into greenhouses where they also showed to be resistant to the Finale® herbicide (Bayer CropScience) at a concentration 2.5 L/ha, growing green and vigorously as did not the non-transgenic control plants that died 7 days after treatment
Disciplinas: Agrociencias,
Química
Palabras clave: Fitotecnia,
Bioquímica,
Genética,
Papa,
Solanum tuberosum,
Organismos genéticamente modificados (OGM),
Resistencia a herbicidas,
Herbicidas,
Transgénicos,
Fosfinotricina
Keyword: Agricultural sciences,
Chemistry,
Crop husbandry,
Biochemistry,
Genetics,
Potato,
Solanum tuberosum,
Genetically modified organisms (GMO),
Herbicides,
Transgenics,
Phosphinothricin
Texto completo: Texto completo (Ver PDF)