Evaluación del daño basal e inducido en el ADN de linfocitos de tres líneas de ratones, mediante el ensayo cometa alcalino
Título del documento: Evaluación del daño basal e inducido en el ADN de linfocitos de tres líneas de ratones, mediante el ensayo cometa alcalino
Revista: Biotecnología aplicada
Base de datos: PERIÓDICA
Número de sistema: 000352865
ISSN: 0864-4551
Autores: 1
2
2
Instituciones: 1Instituto Finlay, Vicepresidencia de Investigaciones, La Habana. Cuba
2Universidad de La Habana, Instituto de Farmacia y Alimentos, La Habana. Cuba
Año:
Volumen: 28
Número: 2
Paginación: 96-100
País: Cuba
Idioma: Español
Tipo de documento: Artículo
Enfoque: Experimental, aplicado
Resumen en español Las rupturas de simple cadena y la formación de sitios lábiles al álcali en el ADN, son parámetros ampliamente utilizados para la detección de genotoxicidad. Se ha demostrado su implicación en enfermedades degenerativas, en el cáncer, y recientemente, su vínculo con el estrés oxidativo. En la década de 1980 se desarrolló la variante alcalina de la electroforesis de células individuales (ensayo cometa), para la detección de daño en el ADN. Por primera vez se proporcionaron datos en células individuales. Este artículo tuvo como objetivo la comparación de la frecuencia basal e inducida con ciclofosfamida, de las rupturas de simple cadena y la formación sitios lábiles al álcali en el ADN de leucocitos de sangre periférica, mediante el ensayo cometa alcalino, en tres líneas de ratones. Se utilizaron 10 ratones de los dos sexos, de las líneas Balb/c, OF-1 y NMRI. Se formó un grupo control negativo (al que no se no le administró ninguna sustancia), dos grupos controles, a los que se administraron sustancias vehículo, y un grupo control positivo al que se administraron 50 mg/kg de ciclofosfamida por vía intraperitoneal. Pasados 14 días, se realizó la electroforesis alcalina de células individuales en gel de leucocitos de sangre periférica, para demostrar el posible daño en el ADN. Se concluyó que la línea más adecuada para estos estudios es la Balb/c, por la baja frecuencia basal que presentan las variables analizadas. Este resultado indica que puede ser el mejor biomodelo para la evaluación preclínica de drogas, vacunas y otros productos
Resumen en inglés The formation of single-strand breaks and alkali-labile sites on DNA has been extensively used for genotoxicity testing, given its involvement in degenerative disorders, cancer and oxidative stress. An alkaline variation of the single-cell electrophoresis (comet) assay used for the detection of DNA damage was developed during the eighties, providing data on this phenomenon at the level of individual cells for the first time. The present work employs the alkaline comet assay to compare three mouse lines regarding the basal and cyclophosphamideinduced frequency of single-strand breaks and the appearance of alkali-labile sites in DNA from peripheral blood lymphocytes. A total of 10 mice/sex/group of the Balb/c, OF-1 and NMRI lines were treated for 14 days, distributed into an untreated negative control group, two groups receiving excipients and a positive control group receiving intraperitoneal cyclophosphamide at 50 mg/kg. After 14 days, single cells from peripheral blood leukocytes were analyzed by alkaline electrophoresis to estimate DNA damage. It was concluded that the best choice for this type of studies is represented by the Balb/c line, due to its low basal frequency for the analyzed variables. This result indicates that Balb/c may be the best biomodel for preclinical testing of drugs, vaccines and other products
Disciplinas: Biología
Palabras clave: Genética,
Ensayo cometa,
Genotoxicidad,
Ciclofosfamida,
Linfocitos
Keyword: Biology,
Genetics,
Comet assay,
Genotoxicity,
Cyclophosphamide,
Lymphocytes
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