Revista: | Biotecnología aplicada |
Base de datos: | PERIÓDICA |
Número de sistema: | 000349132 |
ISSN: | 0864-4551 |
Autors: | Soto, Natacha1 Enríquez, Gil A1 Ferreira, Aleines1 Corrada, Miriel1 Fuentes, Alejandro1 Tiel, Kenia1 Pujol, Merardo1 |
Institucions: | 1Centro de Ingeniería Genética y Biotecnología, División de Plantas, La Habana. Cuba |
Any: | 2007 |
Volum: | 24 |
Número: | 2 |
Paginació: | 139-144 |
País: | Cuba |
Idioma: | Español |
Tipo de documento: | Artículo |
Enfoque: | Experimental |
Resumen en español | Se desarrolló una metodología rápida y eficiente para la transformación genética de segmentos internodales de tallos de papa (Solanum tuberosum L.), de la variedad Désirée, mediante Agrobacterium tumefaciens, utilizando fosfinotricina (PPT, glufosinato de amonio) como agente de selección. Esta metodología provocó una eficiencia de transformación del 68% y la inducción de brotes después de 4 a 5 semanas en presencia de 2 mg/L de fosfinotricina. Se empleó exitosamente el ensayo del clorofenol rojo en segmentos de hojas de plantas transformadas, lo cual demostró la expresión del gen bar. La presencia de este gen en el genoma de los clones resistentes se confirmó mediante reacción en cadena de la polimerasa. Además, se observó la elevada resistencia de clones transgénicos hasta la concentración de 500 mg/L de fosfinotricina, con un desarrollo fenotípico normal. Estas plantas transgénicas se transplantaron a casas verdes, y después de ser asperjadas con el herbicida Finale® (Bayer CropScience), a una concentración de 2.5 L/ha, se mantuvieron vigorosas y de color verde, a diferencia del control no transgénico, que murió después de 7 días |
Resumen en inglés | This work describes the development of a fast and efficient methodology for Agrobacterium tumefaciens-mediated genetic transformation of internodal stem segments from potato (Solanum tuberosum L.), cultivar Désirée, using phosphinothricin (PPT, glufosinate ammonium) as a selection agent. This methodology has a transformation efficiency of 68%, inducing shoots after 4 to 5 weeks in the presence of 2 mg/L of phosphinothricin. The expression of the bar gene in leaf segments from resistant, transformed plants was demonstrated by the chlorophenol red assay, as was its presence in the genome of explants by Polymerase Chain Reaction. An additional observation was the presence of high levels of resistance to phosphinothricin (up to 500 mg/L) in the transgenic clones, with an otherwise normal phenotype. These transgenic plants were transplanted to greenhouses and after aspersion with the herbicide Finale® (Bayer CropScience) at 2.5 L/ha remained healthy and green, in contrast with the non-transgenic controls which died after 7 days |
Disciplines | Agrociencias, Química |
Paraules clau: | Fitotecnia, Bioquímica, Genética, Papa, Solanum tuberosum, Organismos genéticamente modificados (OGM), Resistencia, Herbicidas, Transgénicos, Fosfinotricina |
Keyword: | Agricultural sciences, Chemistry, Crop husbandry, Biochemistry, Genetics, Potato, Solanum tuberosum, Genetically modified organisms (GMO), Resistance, Herbicides, Transgenics, Phosphinothricin |
Text complet: | Texto completo (Ver PDF) |