Desarrollo de una prueba inmunocromatográfica con avidina-biotina para la detección de anticuerpos contra el antígeno e de hepatitis B en plasma humano



Título del documento: Desarrollo de una prueba inmunocromatográfica con avidina-biotina para la detección de anticuerpos contra el antígeno e de hepatitis B en plasma humano
Revista: Biotecnología aplicada
Base de datos: PERIÓDICA
Número de sistema: 000325561
ISSN: 0864-4551
Autors: 1
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Institucions: 1Centro de Ingeniería Genética y Biotecnología, División de Inmunodiagnóstico y Genómica, La Habana. Cuba
Any:
Període: Jul-Dic
Volum: 24
Número: 3-4
Paginació: 254-264
País: Cuba
Idioma: Español
Tipo de documento: Artículo
Enfoque: Experimental, aplicado
Resumen en español La desaparición del antígeno e de hepatitis B con la presencia de los anticuerpos plasmáticos antiantígeno e puede indicar una respuesta terapéutica satisfactoria en pacientes con hepatitis B crónica. Las pruebas inmunocromatográficas desarrolladas para el diagnóstico de enfermedades utilizan diferentes combinaciones de anticuerpos y pueden emplear la tecnología de avidina o estreptavidina-biotina para aumentar la sensibilidad analítica. Se describe el uso de la avidina-biotina para el desarrollo de una prueba inmunocromatográfica rápida para la detección de anticuerpos antiantígeno e en plasma. Se detectaron estos en el laboratorio mediante dos pruebas inmunocromatográficas rápidas con la utilización en una de ellas de la tecnología de avidina-biotina. Estas pruebas se desarrollaron con formato de inhibición competitiva de un solo paso y amplificada o no con avidina-biotina. Se aplicaron anticuerpos monoclonales antiantígeno e obtenidos mediante hibridación celular. Mediante ellas se evaluaron 46 muestras plasmáticas clasificadas en positivas y negativas a los anticuerpos antiantígeno con una prueba inmunocromatográfica Advanced QualityTM de referencia. Se estudió el posible tiempo de vencimiento de los reactivos biológicos constituyentes de esas pruebas con experimentos de termoestabilidad acelerada. Se analizó la posible interferencia en plasma de algunos compuestos bioquímicos en el uso de esos ensayos. Se obtuvieron 4 anticuerpos monoclonales murinos antiantígeno e y solo uno de ellos se usó con un anticuerpo policlonal antiantígeno e conjugado con oro en esas pruebas inmunocromatográficas. Ambas pruebas con sus reactivos biológicos estables discriminaron las muestras positivas y negativas a anticuerpos antiantígeno e, igual que la prueba comercial. No existió interferencia de los compuestos bioquímicos estudiados en esas pruebas. Las dos pruebas inmunocromatográficas desarrolladas en el laboratorio son útiles para
Resumen en inglés The disappearance of antigen e of hepatitis B in the presence of the plasmatic antibodies against antigen e may indicate a satisfactory therapeutic response in patients with chronic hepatitis B. The immuno-chromatographic test carried out in the diagnosis of diseases use different antibody combinations and may employ the avidin or streptavidin-biotin technology to develop a rapid immuno-chromatographic test for the detection of antibodies anti-antigen e in the plasma. They were detected in the laboratory by means of two fast immuno-chromatographic tests when using in one of them the avidin-biotin technology. These tests are carried out with a one-step competitive inhibition format and amplified or not with avidin-biotin. Monoclonal antibodies against antigen e obtained by cellular hybridization were used. Forty-six plasmatic samples classified as possitive and negative to the anti-antigen antibodies were evaluated with a reference immunochromatographic test Advanced QualityTM. The possible expiry time of the biological reagents forming part of these tests were studied with accelerated thermal-stability experiments. The possible interference in the plasma of some of the biochemical compounds used in these trials was analyzed. Four murine monoclonal antibodies anti-antigen e were obtained and only one of them was used in these immunochromatographic tests with an anti-antigene polyclonal antibody conjugated with gold. Both tests and their stable biological reagents discriminated the positive and negative samples to the antibodies anti-antigen e, as well as the commercial test. There was no interference in the biochemical compounds studied in these tests. Both immuno-chromatographic tests made in the laboratory are useful to detect antibodies anti-antigen e in the plasma. The avidin-biotin increased the analytical sensitivity of this type of fast immuno-chromatographic test without altering its performance features
Disciplines Medicina
Paraules clau: Diagnóstico,
Gastroenterología,
Inmunología,
Hepatitis B,
Antígeno e,
Inmunocromatografía,
Avidina-biotina,
Inmunodiagnóstico
Keyword: Medicine,
Diagnosis,
Gastroenterology,
Hepatitis B,
Antigen e,
Immunochromatography,
Avidin-biotin,
Immunodiagnosis,
Immunology
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