| Revista: | Anais da Academia Brasileira de Ciencias |
| Base de datos: | PERIÓDICA |
| Número de sistema: | 000364505 |
| ISSN: | 0001-3765 |
| Autors: | Sena, Amanda R1 Junior, Gildomar L.V1 Goes-Neto, Aristoteles1 Taranto, Alex G1 Pirovani, Carlos P2 Cascardo, Julio C.M2 Zingali, Russolina B3 Bezerra, Marcos A4 Assis, Sandra A1 |
| Institucions: | 1Universidade Estadual de Feira de Santana, Departamento de Saude, Feira de Santana, Bahia. Brasil 2Universidade Estadual de Santa Cruz, Ilheus, Bahia. Brasil 3Universidade Federal do Rio de Janeiro, Instituto de Ciencias Biomedicas, Rio de Janeiro. Brasil 4Universidade Estadual do Sudoeste da Bahia, Faculdade de Formacao de Professores, Jequie, Bahia. Brasil |
| Any: | 2011 |
| Període: | Jun |
| Volum: | 83 |
| Número: | 2 |
| Paginació: | 599-610 |
| País: | Brasil |
| Idioma: | Inglés |
| Tipo de documento: | Artículo |
| Enfoque: | Experimental, aplicado |
| Resumen en inglés | The enzyme glucanase from Moniliophthora perniciosa was produced in liquid medium and purified from the culture supernatant. A multivariate statistical approach (Response Surface Methodology - RSM) was employed to evaluate the effect of variables, including inducer (yeast extract) and fermentation time, on secreted glucanase activities M. perniciosa detected in the culture medium. The crude enzyme present in the supernatant was purified in two steps: precipitation with ammonium sulfate (70%) and gel filtration chromatography on Sephacryl S-200. The best inducer and fermentation time for glucanase activities were 5.9 g L-1 and 13 days, respectively. The results revealed three different isoforms (GLUI, GLUII and GLUIII) with purification factors of 4.33, 1.86 and 3.03, respectively. The partially purified enzymatic extract showed an optimum pH of 5.0 and an optimum temperature of 40°C. The enzymatic activity increased in the presence of KCl at all concentrations studied. The glucanase activity was highest in the presence of 0.2 M NaCl. The enzyme showed high thermal stability, losing only 10.20% of its specific activity after 40 minutes of incubation at 90°C. A purified enzyme with relatively good thermostability that is stable at low pH might be used in future industrial applications |
| Resumen en portugués | A enzima glucanase de Moniliophthora perniciosa foi produzida em meio líquido e purificada a partir do sobrenadante da cultura. A metodologia de superfície de resposta (MSR) foi usada para avaliar os efeitos das variáveis, incluindo indutor (extrato de levedura) e tempo de fermentação, na atividade da glucanase de M. perniciosa detectada no meio de cultura. A enzima presente no sobrenadante foi purificada em duas etapas: precipitação com sulfato de amônio (70%) e cromatografia de filtração em gel em Sephacryl S-200. A produção da enzima glucanase foi maior na concentração de 5,9 g L-1 de extrato de levedura e 13 dias de fermentação. Os resultados mostraram três diferentes isoformas (GLUI, GLUII e GLUIII) com fatores de purificação de 4,33, 1,86 e 3,03, respectivamente. O extrato enzimático parcialmente purificado mostrou um pH ótimo de 5,0 e uma temperatura ótima de 40°C. A atividade enzimática aumentou na presença de KCl em todas as concentrações estudadas. A atividade da glucanase foi maior na presença de NaCl 0,2 M. A enzima apresentou alta estabilidade térmica, perdendo apenas 10,20% de sua atividade específica após 40 minutos de incubação a 90°C. Os resultados de termoestabilidade e a atividade em baixo pH mostraram que a enzima glucanase de M. perniciosa tem características promissoras para futuras aplicações industriais |
| Disciplines | Biología, Química |
| Paraules clau: | Fermentaciones, Bioproducción, Glucanasa, Purificación química, Actividad enzimática, Moniliophthora perniciosa |
| Keyword: | Biology, Chemistry, Fermentation, Bioproduction, Glucanase, Chemical purification, Enzymatic activity, Moniliophthora perniciosa |
| Text complet: | Texto completo (Ver HTML) |
