Structural analysis of viral factories: from conventional microscopy to electron tomography



Título del documento: Structural analysis of viral factories: from conventional microscopy to electron tomography
Revista: Acta microscópica
Base de datos: PERIÓDICA
Número de sistema: 000274576
ISSN: 0798-4545
Autors: 1

Institucions: 1Centro Nacional de Biotecnología, Laboratorio de Estructura Celular, Madrid. España
Any:
Volum: 16
Número: 1-2
Paginació: 42-51
País: Venezuela
Idioma: Inglés
Tipo de documento: Artículo
Enfoque: Experimental
Resumen en español Las factorías virales son grandes estructuras construidas por componentes celulares y virales, donde los virus insertan los complejos macromoleculares necesarios para la replicación del genoma y la morfogénesis de nuevas partículas virales. Estamos estudiando cómo las factorías se construyen aplicando varios métodos de microscopía electrónica (ME). Nuestro objetivo es obtener mapas tridimensionales (3D) de estas estructuras complejas para estudiar cómo se forman los complejos replicativos, cómo se transfiere el genoma replicado a los sitios de ensamblaje y cómo nuevas partículas infecciosas se ensamblan y maduran en las factorías virales. En este trabajo revisamos las técnicas de ME que aportan información 3D de las células y cómo podemos aplicarlas para caracterizar la compleja organización de las factorías virales. Las reconstrucciones generadas a partir de cortes seriados y las réplicas metálicas de células procesadas mediante criofractura proporcionan mapas 3D de media resolución que planteamos usar como herramientas complementarias para ayudar a la interpretación de los mapas celulares de gran complejidad que se obtendrán por tomografía electrónica. En este contexto los virus nos están aportando modelos para comprender la arquitectura y las rutas de tráfico celular
Resumen en inglés Viral factories are large structures built by cellular and viral components where viruses insert the macromolecular complexes needed for genome replication and morphogenesis of new viral particles. We are studying how factories are built and work with the assistance of a variety of electron microscopy (EM) methods. Our goal is to obtain three-dimensional (3D) maps of these very complex structures to study how replication complexes are formed, how replicated genomes are transferred to assembly sites and how new, infectious viral particles assemble and mature inside the factories. In the present work we revise EM techniques that provide 3D information of cells to describe how we can apply them to characterize the complex organization of virus factories. Reconstructions from serial sections and metal replicas after freeze-fracture provide 3D maps of medium resolution that we plan to use as complementary tools to assist in the interpretation of the very complex maps of cells to be obtained by electron tomography (ET). Within this context viruses are providing us with models to understand cellular trafficking pathways and cell architecture
Disciplines Biología
Paraules clau: Genética,
Virus,
Biotecnología,
Factorias virales,
Replicación genómica,
Partículas virales,
Microscopía electrónica,
Tomografía
Keyword: Biology,
Genetics,
Virus,
Viral factories,
Genome replication,
Viral particles,
Electron microscopy,
Tomography
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